摘要：
目的 探讨水通道蛋白1,5及尿素转运蛋白B1在慢性肾衰竭小鼠脑组织中表达水平的变化及影响,进一步揭示血液透析脑型失衡综合征可能的分子基础. 方法 选用6～8周龄,雄性BALB/c小鼠,将小鼠分为正常组(N)、假手术组(S)和慢性肾衰竭模型组(CRF组).CRF模型小鼠通过对其右肾2/3肾皮质透热毁损,并在1周后将左肾完全切除的方法建立.假手术组小鼠只进行麻醉和手术切口,肾脏不做处理.正常组的小鼠不做任何处理.模型建立后10、40和70天3个时间点每组各处死5只小鼠,并留取小鼠的肾脏、血清和脑组织标本.检测三组小鼠肾组织病理、血清肌酐和尿素氮;用Western Blotting方法测定在造模后10天、40天和70天3组小鼠脑组织内水通道蛋白1,5(Aquaporin,AQP)及尿素转运蛋白B1(Urea Transportprotein,UT-B1)的表达.结果 CRF模型组在造模后10天肾组织病理结果显示部分肾小囊扩张,球囊粘连,肾小管上皮细胞颗粒样变性.造模后40天、70天表现为部分肾小球增生硬化,部分肾小管萎缩.造模10,40,70,天CRF模型组血清肌酐分别是(841.80±336.93)umol/L、(1885.17±689.49)umol/L、(1276.56±496.09)umol/L,与正常组和假手术组肌酐值相比均显著升高(10d:F=26.768,P=0.007;40d: F=34.928,P=0.004;70d.: F29.998,P=0.005),提示慢性肾衰竭模型成功.Western Blotting检测实验各组脑组织AQP1、AQP5及UT-B1的表达,结果显示:在造模10,40,70天,CRF模型组UT B1均未表达,正常组及假手术组表达差别无统计学意义.在造模后10天正常组AQP1表达量与假手术组及CRF组比较均有统计学差异(P＜0.05).CRF模型组较正常组AQP1表达量升高46.67％(t=0.122,P=0.001);AQP-5表达量较正常组升高41.09％(t=0.012,P=0.001).在造模后40天,假手术组与正常组AQP-1,5表达量无显著性差异;而CRF模型组AQP-1表达量较正常组升高28.98％(t=4.926,p=0.001),AQP-5表达量较正常组升高20.83％(t=0.857,P=0.003).在造模后70天,假手术组与正常组AQP-1,5表达量无显著性差异,而CRF模型组AQP-1表达量较正常组升高30.26％(t=8.471,P=0.001);AQP-5表达较正常组升高45.67％(t=3.352,P=0.001).结论 CRF模型小鼠脑组织AQP1,5的表达明显增加,同时伴有尿素转运蛋白B1的不表达或表达明显下降,这一结果为揭示脑型失衡综合症提供了线索.脑组织尿素转运蛋白的低表达导致快速血液透析脑中尿素清除延迟,进而形成脑血尿素浓度梯度,驱动水分通过过多表达的水道蛋白进入脑组织,导致脑水肿.
