资源类型：
收录情况：
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-E
文章类型：
单位：
[1] 首都医科大学附属北京友谊医院北京热带医学研究所
医技科室
北京热带医学研究所
北京热带医学研究所
首都医科大学附属北京友谊医院
[2] 热带病防治研究北京市重点实验室
出处：
ISSN：
关键词：
刚地弓形虫
致密颗粒蛋白GRA2
反转录基因克隆
原核表达
摘要：
目的克隆弓形虫RH株致密颗粒蛋白2（GRA2）的全长基因,在大肠埃希菌工程菌中重组表达GST-HisGRA2融合蛋白。方法提取弓形虫总RNA,反转录获得cDNA,PCR扩增GRA2基因全长,与pET-41Ek/LIC载体通过基因重组直接连接,在大肠埃希菌RosettaTM（DE3）pLysS工程菌中诱导表达重组融合蛋白,然后采用SDS-PAGE和Western blot鉴定重组蛋白产物。结果 PCR鉴定弓形虫GRA2全基因重组表达质粒构建正确;诱导表达的GSTHis-GRA2融合重组蛋白分子质量单位为52ku,与预测值相符。结论本研究成功构建了弓形虫GRA2全基因重组蛋白质粒,该质粒能表达GRA2蛋白,为研究GRA2与宿主细胞的相互作用奠定了基础。
基金：
国家自然科学基金项目（No.81071375,81301404）；;北京市自然科学基金项目（No.7132042）；;首都医科大学基础-临床科研合作基金项目（No.13JL16）；;首都医科大学附属北京友谊医院科研启动基金项目（No.201130yykyqd）；
第一作者：
第一作者单位：
[1] 首都医科大学附属北京友谊医院北京热带医学研究所
[2] 热带病防治研究北京市重点实验室
推荐引用方式(GB/T 7714)：
黄敏君,薛峰,洪彩玲,等.刚地弓形虫致密颗粒蛋白gra2全基因的原核重组表达[J].中国病原生物学杂志.2013,8(12):1093-1095+1112.
