目的观察不同剂量黄芪甲苷（astragalosideⅣ,ASTⅣ）对高迁移率族蛋白B1（high mobility group box-1 protein,HMGB1）介导小鼠调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）免疫功能的拮抗效应并探讨其药物作用机制。方法采用清洁级BALB/c小鼠,处死后分离脾脏CD4+CD25+Treg,在72孔板上按随机数字表法将Treg分为4组进行培养（每组18孔）:（1）正常对照组:单纯Treg;（2）HMGB1组:HMGB1（1μg/ml）+Treg;（3）HMGB1+ASTⅣ治疗Ⅰ组:HMGB1（1μg/ml）+ASTⅣ（50μg/ml）+Treg;（4）HMGB1+ASTⅣ治疗Ⅱ组:HMGB1（1μg/ml）+ASTⅣ（100μg/ml）+Treg。以上4组再各分为3个亚组（每组6孔）,分别于HMGB1刺激后24,48,72 h收集Treg。采用流式细胞仪及荧光定量PCR法检测Treg胞内叉头翼状螺旋转录因子p3（Foxp3）蛋白和基因表达水平,ELISA法检测Treg细胞孵育上清液中IL-10及TGF-β分泌水平。结果HMGB1刺激Treg后,Foxp3蛋白及基因表达水平在2472 h均较对照组有所下降（P(0.01）,其中以作用72 h下调尤为明显,细胞培养上清中IL-10及TGF-β水平呈现与Foxp3相同的变化趋势;而ASTⅣ治疗组Foxp3蛋白及基因表达水平在给药后2472 h均较HMGB1组明显升高（P(0.05）,且HMGB1+ASTⅣ治疗Ⅱ组Foxp3蛋白及基因表达水平在给药后2472 h明显高于HMGB1+ASTⅣ治疗Ⅰ组（P(0.05）,细胞培养上清中IL-10及TGF-β水平亦呈现与Foxp3相同的变化趋势。结论不同剂量ASTⅣ在体外均可拮抗HMGB1对小鼠Treg免疫功能的影响,呈剂量依赖性,提示其对HMGB1介导的促炎效应具有显著抑制作用。