摘要:
目的观察结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)对大鼠肝脏前体细胞(WB-F344)分化的影响,进一步观察细胞外基质的变化。方法采用MTT法检测CTGF对WB-F344细胞活性的影响。采用Western blotting方法分别检测CTGF诱导WB-F344细胞后胆管细胞标志物CK-19及肝细胞标记物AFP、ALB的变化。采用Western blotting和实时荧光定量PCR检测细胞外基质相关指标金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of metallo proteinase,TIMP)-1在mRNA水平和蛋白水平的变化。结果作用于WB-F344细胞24h后,CTGF组的细胞活性大于转化生长因子-β组(P(0.05)。5ng/ml CTGF作用于WB-F344细胞24h后,可以明显改变WB-F344细胞表面标记物在蛋白水平的表达。幼稚肝细胞标记物AFP的表达是对照组的0.38倍(P=0.002),成熟肝细胞标记物ALB和胆管细胞标记物CK-19的表达均增加,分别为对照组的3.5倍和1.58倍(P分别为0.000、0.002)。同时,5ng/ml CTGF可以上调WB-F344细胞TIMP-1在mRNA水平和蛋白水平的表达,分别为对照组的2.47倍和3.36倍(P=0.000、0.002)。结论 5ng/ml CTGF有诱导肝脏前体细胞向肝脏实质细胞分化的趋势,并伴有WB-F344细胞外基质相关指标TIMP-1表达的上调。