资源类型：
期刊
收录情况：
◇ 统计源期刊
文章类型：
单位：
[1]100050,北京,首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心
临床科室
国家中心肝病分中心
首都医科大学附属北京友谊医院
出处：
肝脏.2007,12(3):175-179.
ISSN：
1008-1704
关键词：
金属蛋白酶组织抑制因子
小干扰RNA
腺相关病毒
肝星状细胞
摘要：
目的 观察以腺相关病毒(AAV)为载体含有针对金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1具有较强抑制作用的小干扰RNA(siRNA)感染大鼠星状细胞系HSC-T6后TIMP-1及基质金属蛋白酶13(MMP13)的表达情况.方法 将对大鼠TIMP-1基因具有最强抑制作用的一对siRNA,在体外构建为短发夹siRNA表达载体后,将其包装为重组AAV-rAAV/siRNA-TIMP-1/neo并感染HSC-T6,于感染后4周及12周应用荧光定量PCR方法及Western blot方法分别检测TIMP-1及MMP13 mRNA及蛋白质表达情况.结果 经PCR、酶切及序列测定证实抑制作用最强的1对siRNA在体外构建的shRNA表达载体成功克隆.将重组质粒包装成病毒后感染HSC-T6细胞,与对照组细胞相比,rAAV/siRNA-TIMP-1/neo感染组在感染后4周及12周细胞TIMP-1 mRNA及蛋白质表达水平明显降低(P＜0.01),而MMP13 mRNA及蛋白质表达水平明显增高(P＜0.01).结论 化学合成的siRNA在短时期内可有效地抑制TIMP-1基因的表达,重组病毒rAAV/siRNA-TIMP-1/neo可长期有效地抑制TIMP-1基因表达.
基金：
中国国家自科基金委(30500425);北京市自然科学基金(7053066)
第一作者：
丛敏
第一作者单位：
[1]100050,北京,首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心
推荐引用方式(GB/T 7714)：
丛敏,刘天会,徐雍,等.腺相关病毒介导的小干扰RNA对大鼠肝星状细胞金属蛋白酶组织抑制因子-1及基质金属蛋白酶13表达的影响[J].肝脏.2007,12(3):175-179.
