摘要:
目的观察供肝转染IL-10后基因表达情况.方法应用改良"二袖套法"行Lewis到BN大鼠肝移植11例,然后分为对照组3例; 空载体转染组4例,术中供肝冷保存期门静脉注射Lipofectamine 2000-pCR3.1空载体质粒复合物,保存45 min后行肝移植; 重组IL-10(rIL-10)转染组4例,术中供肝冷保存期门静脉注射Lipofectamine 2000-pCR3.1 rIL-10复合物,保存45 min后行肝移植.术后第6天处死全部大鼠,取血清检测IL-10水平,另取肝组织行免疫组化染色和RT-PCR检测肝细胞IL-10表达水平.结果 rIL-10转染组血清IL-10水平明显升高,肝上下腔静脉IL-10水平可达(639.27±67.11) pg/ml,是肝下下腔静脉IL-10水平的近1.4倍(P=0.024); 免疫组化染色结果示肝细胞胞桨呈棕黄色或深棕色,而其他两组肝细胞着色轻微或不明显.肝组织RT-PCR显示,IL-10 mRNA的表达在rIL-10转染组明显处于高水平(P=0.000).结论脂质体介导,体外冷保存期经门静脉途径进行供肝转染IL-10,可以使IL-10在肝脏获得较高水平的表达.