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pPICZα-synBPIm600酵母表达载体的构建和鉴定

Construction and Identification of pPICZα-synBPIm600 Recombinant Expression Vector

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资源类型:
单位: [1]首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心 [2]吉林大学免疫学系2001级博士 [3]首都医科大学免疫学教研室
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关键词: 杀菌/渗透增强蛋白 rBPIm23重组抗菌蛋白 表达载体 巴斯德毕赤酵母

摘要:
为使rBPIm23重组抗菌蛋白在毕赤酵母表达系统中分泌表达,拟构建synBPIm600酵母表达载体.以pUC18-synBPI414质粒为模板扩增synBPI200基因片段,经XhoI/EcoRI双酶切获得synBPI185 bp基因片段;EcoRI/SalI双酶切PBV220-BPIm600质粒获得BPIm420基因片段;将上述2个基因片段连接后定向克隆到pPICZα酵母表达载体上.连接产物转化E.coli TOP 10 F',在含Zeocin的低盐LB固体培养基上筛选阳性转化子.阳性克隆菌经菌落PCR法鉴定、酶切分析和测序鉴定,结果与预期相符.提示:成功构建了pPICZα-synBPIm600酵母表达载体.

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第一作者:
第一作者单位: [1]首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心
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