摘要:
目的:研究复方中药861对大鼠肝星状细胞系(HSC-T6)一氧化氮合酶(NOS)表达及其酶活性的影响,并探讨该药预防、治疗早期门脉高压的可行性.方法:细胞密度为1×105/ml的HSC-T6接种于细胞培养皿中,95%O2,5%CO2,37℃,培养24h进行以下分组实验,每组重复6皿,继续培养24h.1组:HSC-T6空白对照组;2组:HSC-T6加复方中药861(2mg/ml);3组:HSC-T6加复方中药861(4mg/ml);4组:HSC-T6加复方中药861(8mg/ml);5组:HSC-T6加复方中药861(4mg/ml)加L-硝基精氨酸甲酯(L-NAME,4mg/ml).采用化学比色法测定NOS活性,采用硝酸还原酶法测定培养液一氧化氮(NO)水平.4%多聚甲醛固定细胞2h,采用免疫细胞化学法观察HSC-T6诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达.结果:复方中药861能增加HSC-T6 NOS活性(P<0.01),上清液NO水平也平行增加(P<0.01),L-NAME不能抑制复方中药861刺激的HSC-T6合成、分泌NO增加(P>0.05).免疫细胞化学研究发现,活化的HSC-T6细胞浆有iNOS表达,复方中药861能增加HSC-T6 iNOS表达.结论:活化HSC-T6 iNOS表达阳性,与自分泌NO有关;复方中药861能明显增加HSC-T6 iNOS表达及其酶活性,NO合成、分泌增加.复方中药861可能通过增加肝星状细胞分泌NO途径,抑制肝星状细胞的收缩,从而降低肝窦阻力.因此,复方中药861在预防、治疗早期门脉高压中可能具有重要作用.