摘要:
目的明确脓毒症大鼠肾脏皮质微循环特点及其与血浆内皮微粒(EMP)表达之间的关系, 评价血必净注射液作为抗菌药物辅助治疗的干预效果。方法将8~10周龄无特定病原体(SPF)级雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(Sham组)、阳性药物对照组和血必净组, 每组10只。采用高位结扎的盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症大鼠模型;Sham组只翻动盲肠, 不进行结扎穿孔。基于高位结扎CLP致死率高, 血必净组于制模后即刻经尾静脉注射血必净注射液4 mL/kg、12 h 1次, 亚胺培南/西司他丁注射液90 mg/kg、6 h 1次;阳性药物对照组以相同方法给予生理盐水和亚胺培南/西司他丁注射液;Sham组给予等量生理盐水以相同频次进行干预。术后48 h记录大鼠平均动脉压(MAP)和血乳酸(Lac);应用测流暗场成像技术监测肾脏皮质微循环血流;采用哌莫硝唑免疫组化法评估肾组织缺氧程度;应用流式细胞仪检测血浆EMP水平, 并分析EMP与肾脏皮质微循环灌注指标的相关性;同时测量血肌酐(SCr), 并采用肾组织损伤评分(Paller评分)评价肾组织病理损伤严重程度。结果与Sham组相比, 阳性药物对照组和血必净组大鼠灌注血管密度(PVD)、微血管流动指数(MFI)和MAP均明显下降, 缺氧指示剂哌莫硝唑阳性表达明显增加, Lac、EMP、Paller评分和SCr均明显升高。但与阳性药物对照组比较, 血必净组大鼠肾脏皮质微循环血流明显改善, PVD和MFI显著升高〔PVD(mm/mm2):16.20±1.20比9.77±1.12, MFI:2.46±0.05比1.85±0.15, 均P(0.05〕, Lac水平明显降低(mmol/L:4.81±1.23比6.08±1.09, P(0.05), MAP略有升高〔mmHg(1 mmHg=0.133 kPa):84.00±2.00比80.00±2.00, P)0.05〕, 提示血必净注射液可改善脓毒症大鼠肾脏皮质微循环灌注, 而这种效应不依赖于MAP的改变。血必净组肾脏皮质哌莫硝唑阳性表达量较阳性药物对照组明显降低〔(35.89±1.13)%比(44.93±1.37)%, P(0.05〕, 提示血必净注射液能减轻脓毒症大鼠肾脏缺氧程度。血必净组大鼠血浆EMP水平较阳性药物对照组显著降低(×106/L:3.49±0.17比5.78±0.22, P(0.05), 且EMP水平与PVD和MFI均呈显著负相关(r值分别为-0.94和-0.95, 均P(0.05), 提示脓毒症大鼠血浆EMP水平升高与肾脏皮质微循环障碍高度相关, 血必净注射液能抑制EMP的产生。血必净组Paller评分较阳性药物对照组显著降低(分:46.90±3.84比62.70±3.05, P(0.05), SCr水平亦明显低于阳性药物对照组(μmol/L:121.1±12.4比192.7±23.9, P(0.05), 提示血必净注射液能减轻脓毒症大鼠肾损伤程度, 改善肾功能。结论作为抗菌药物的辅助治疗, 血必净注射液可抑制脓毒症大鼠血浆EMP表达, 改善肾脏皮质微循环, 减轻肾损伤。