目的 探究盐酸小檗碱单药及联合应用对金黄色葡萄球菌的体外抗菌活性。方法 收集首都医科大学附属北京友谊医院2020年4月至2021年3月临床分离的金黄色葡萄球菌28株，采用琼脂稀释法测定盐酸小檗碱对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度，采用棋盘法检测盐酸小檗碱与左氧氟沙星、环丙沙星、甲氧苄啶、克林霉素、利福平、万古霉素和庆大霉素的联合抑菌活性，对分离株进行MLST分型，选取优势ST型（ST5,ST188,ST239）进行时间-杀菌实验和生物膜形成实验。结果 盐酸小檗碱对82.1%金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度（MIC）为128 mg/L,10.7%菌株的MIC为64 mg/L,7.1%菌株的MIC为256 mg/L;对MRSA和MSSA的体外抑菌活性差异无统计学意义（P) 0.05）。盐酸小檗碱与克林霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、万古霉素、庆大霉素、甲氧苄啶和利福平联合应用时，分别有82.14%、78.57%、96.43%、96.43%、67.86%、17.86%和71.43%的菌株表现协同作用;盐酸小檗碱能显著抑制细菌数量和生物膜的形成，且随着药物浓度升高，抑制能力逐渐增强。结论 盐酸小檗碱在体外对金黄色葡萄球菌具有良好的抑菌活性，而且与万古霉素、克林霉素、利福平、氟喹诺酮和氨基糖苷类药物具有良好的协同抑菌作用。