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摘要：
本发明公开一种能够快速、简便、定量检测最低抑菌浓度的方法，包括以下步骤：按照CLSI标准(2010版)将一定浓度的新鲜肠球菌悬液，加入到含有浓度梯度抗菌药物的无菌96孔板中共孵育；4h孵育结束后，向各孔加入一定量的荧光染料SYTOX Green和DAPI，室温避光15min，利用荧光酶标仪分别读取各孔两种染料的荧光强度，记为FSYTOX Green和FDAPI；扣除相应本底荧光后，绘制细菌荧光强度比(Pdead/livel)与药物浓度(CDrug)的对应曲线，当Pdead/live不再波动时所对应的最低药物浓度(CDrug)即为该抗生素对该细菌的MIC。[Pdead/live＝FSYTOX Green/FDAPI]。本发明的检测方法具有简便、快速、客观，能对所测数据直接进行数学统计与分析等特点，为测定抗菌药物的最低抑菌浓度提供了新的检测方法，具有广阔的应用前景。
主权项：
一种测定药物最低抑菌浓度的方法，其特征在于，所述方法步骤如下：(1)制备终浓度为2.5×106CFU/ml～5×106CFU/ml的菌悬液；(2)分别制备不同浓度梯度的药物工作液，浓度范围包括512、256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125μg/ml中的；(3)将菌悬液分别加入到上述浓度梯度的药物工作液中，混匀，35℃±0.5℃，孵育4～6h；(4)向菌悬液与药物工作液混合液中加入染料SYTOX Green和DAPI的混合液，终浓度分别为1.5μM和300nM，室温避光作用15min；(5)荧光酶标仪下，分别读取各孔SYTOX Green和DAPI两种染料的荧光强度值；(6)绘制荧光强度比与各药物浓度之间对应曲线图。
事务数据：
3、2013.08.07 授权 授权
2、2012.02.08 实质审查的生效 实质审查的生效
IPC(主分类):G01N 21/64
申请日:20110517
1、2011.12.21 公开 公开
