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摘要:
本发明涉及检测NK细胞活性的方法。该方法为:利用转染技术使靶细胞特异性表达荧光蛋白,得到转染靶细胞;将待测NK细胞与转染靶细胞共孵育,得到第一混合细胞液;向第一混合细胞液中加入第一荧光染料,孵育,得到第二混合细胞液;向第二混合细胞液中加入第二荧光染料,混合,得到第三混合细胞液;利用流式细胞仪检测所述第三混合细胞液,得到活的、早期凋亡的、晚期凋亡的、以及死亡的靶细胞的细胞数比例;其中,第一荧光染料为荧光素标记的磷脂结合蛋白,第二荧光染料为核酸染料,并且荧光蛋白、第一荧光染料和第二荧光染料的发射波长互不相同。本发明的检测NK细胞活性的方法,可以更加全面地反映NK细胞的活性。
主权项:
一种检测NK细胞活性的方法,其特征在于,包括下列步骤:利用转染技术使靶细胞特异性表达荧光蛋白,得到转染靶细胞;将待测NK细胞与所述转染靶细胞共孵育,得到第一混合细胞液;向所述第一混合细胞液中加入第一荧光染料,孵育,得到第二混合细胞液;向所述第二混合细胞液中加入第二荧光染料,混合,得到第三混合细胞液;利用流式细胞仪检测所述第三混合细胞液,得到活的靶细胞的细胞数比例,早期凋亡的靶细胞的细胞数比例,晚期凋亡的靶细胞的细胞数比例以及死亡的靶细胞的细胞数比例;其中,所述第一荧光染料为荧光素标记的磷脂结合蛋白,所述第二荧光染料为核酸染料,并且所述荧光蛋白、所述第一荧光染料和所述第二荧光染料的发射波长互不相同;所述第一荧光染料中,所述荧光素为以下中的一种:藻红蛋白、异硫氰酸荧光素、增强型荧光蛋白、别藻蓝蛋白;所述第二荧光染料为以下中的一种:7?氨基放线菌素D、碘化丙啶、溴化乙锭、吖啶橙、4,6?二脒基?2?苯基吲哚或赫克斯特;所述转染技术为:构建表达荧光蛋白的慢病毒质粒载体,并包装形成慢病毒;用所述慢病毒侵染靶细胞,将目的基因整合到靶细胞的基因组中。
事务数据:
7、2020.10.23 专利申请权、专利权的转移 专利权的转移
IPC(主分类):G01N 21/64
登记生效日:20200929
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变更前权利人:北京倍科为生物技术有限公司
变更后权利人:王昭
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变更前权利人:100000 北京市通州区榆景东路5号院55号楼1层101室406号
变更后权利人:100000 北京市西城区永安路95号
6、2020.03.31 专利申请权、专利权的转移 专利权的转移
IPC(主分类):G01N 21/64
登记生效日:20200311
变更事项:专利权人
变更前权利人:广州金倍来生物科技有限公司
变更后权利人:北京倍科为生物技术有限公司
变更事项:地址
变更前权利人:510000 广东省广州市黄埔区国际生物岛螺旋三路10号706房
变更后权利人:100000 北京市通州区榆景东路5号院55号楼1层101室406号
5、2019.12.17 专利申请权、专利权的转移 专利权的转移
IPC(主分类):G01N 21/64
登记生效日:20191128
变更事项:专利权人
变更前权利人:北京金域医学检验实验室有限公司
变更后权利人:广州金倍来生物科技有限公司
变更事项:地址
变更前权利人:101109 北京市朝阳区京顺东街6号院26号楼1层101、2层201、3层301、4层401
变更后权利人:510000 广东省广州市黄埔区国际生物岛螺旋三路10号706房
4、2018.11.23 专利申请权、专利权的转移 专利权的转移
IPC(主分类):G01N 21/64
登记生效日:20181105
变更事项:专利权人
变更前权利人:首都医科大学附属北京友谊医院
变更后权利人:北京金域医学检验实验室有限公司
变更事项:地址
变更前权利人:100050 北京市宣武区永安路95号
变更后权利人:101109 北京市朝阳区京顺东街6号院26号楼1层101、2层201、3层301、4层401
3、2014.12.03 授权 授权
2、2014.05.07 实质审查的生效 实质审查的生效
IPC(主分类):G01N 21/64
申请日:20140106
1、2014.04.09 公开 公开