目的 探讨传统细胞培养法和PCR结合导流杂交法对解脲支原体（UU）和人型支原体（MH）的检出率、灵敏度、检测速度等差异，判断PCR结合导流杂交法在生殖道感染检测中应用的可行性。方法 选取2020年12月至2021年2月在首都医科大学附属北京友谊医院（通州院区）妇产科就诊的患者301例，将收集的子宫颈脱落细胞分成2份，1份用于细胞培养法进行UU、MH培养鉴定，药敏试剂盒进行病原体的检测；另外1份样本通过PCR结合导流杂交法进行MH、UU[含解脲脲原体（Uu）和微小脲原体（Up1/3/6/14）共5种亚型]、生殖支原体（MG）、淋病奈瑟菌（NG）、沙眼衣原体（CT）和单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSVⅡ）共10种微生物的检测。结果 细胞培养法检出率：MH 6.64%（20/301）、UU 47.18%（142/301）。PCR结合导流杂交法检测结果如下：MH 17.28%（52/301）、UU（含Uu和Up1/3/6/14）:53.82%（162/301）、MG 6.98%（21/301）、NG 2.33%（7/301）、CT 10.30%（31/301）、HSVⅡ6.98%（21/301）。2种方法对UU检测的一致性标本占76.08%（229/301）,47例差异标本的Sanger测序结果与PCR结合导流杂交法检测结果一致，25例与细胞培养法一致；MH一致性的标本占85.38%（257/301）,31例差异标本的Sanger测序结果与PCR结合导流杂交法检测结果一致，13例与细胞培养法一致。结论 PCR结合导流杂交法与细胞培养法对MH、UU的检测具有较高的一致性，均具有较高的特异度和准确率。PCR结合导流杂交法在检测耗时、阳性检出率、检测通量和检测指标数量上均有较大优势，对NG、CT、MG和HSVⅡ的结果输出以及协同感染的检出，对后续的治疗均有重要的参考意义。