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荧光定量pcr检测卡他莫拉杆菌感染的实验室诊断方法学建立及应用

Development of real-time fluorescence quantitative PCR for the detection of Moraxella catarrhalis

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收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 中华系列

单位: [1]首都医科大学附属北京友谊医院儿科,北京,100050 [2]首都医科大学附属北京友谊医院 北京热带医学研究所 热带病防治研究北京市重点实验室 [3]首都医科大学附属北京儿童医院
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关键词: 卡他莫拉杆菌 儿童呼吸道感染 荧光定量PCR

摘要:
目的 建立荧光定量PCR检验卡他莫拉杆菌的实验室诊断方法并检验临床样本.方法 针对卡他莫拉杆菌外膜蛋白COPB设计引物及探针;构建含卡他莫拉杆菌目的基因片段的质粒,梯度稀释后作为标准品,绘制标准曲线;验证实验方法的敏感性;通过检测7种病原体标准株验证该方法的特异性.用新建荧光定量PCR检测321例诊断为哮喘的儿童患者咽拭子标本.结果 绘制新建荧光定量PCRTaqman探针法检测质粒标准品的标准曲线,新建实验室诊断方法的敏感性可达10拷贝/反应,研究方法可成功区分卡他莫拉杆菌与其他6种病原体DNA.检测321例临床咽拭子样本,卡他莫拉杆菌阳性25例,阳性检出率为7.79%.结论 新建荧光定量PCR法具有较高的灵敏度、特异性,能简单、快速、准确、灵敏地检测卡他莫拉杆菌,可以应用于临床样本的检测.

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第一作者:
第一作者单位: [1]首都医科大学附属北京友谊医院儿科,北京,100050
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