目的 了解儿童呼吸道感染中肺炎支原体(MP)感染情况、耐药情况及耐药机制.方法 选取2008年12月～2009年3月在北京友谊医院儿科门诊就诊的呼吸道感染患儿80例,对所有入选对象取咽拭子,行MP培养,直接对咽拭子及培养阳性标本应用巢式PCR技术扩增23S rRNA基因,并对扩增产物行电泳检测及DNA测序分析;并根据扩增基因测序结果足否有基因突变分为耐药组和敏感组,比较2组患儿在就诊前口服大环内酯类药物情况,门诊与病房MP耐药率是否存在差别.结果 直接对咽拭子23S rRNA基因进行巢式PCR扩增、电泳、测序,阳性32例,经MP分离培养阳性并经测序鉴定证实MP 8例,其中1例咽拭子培养结果阳性而直接咽拭子PCR结果阴性,MP阳性总数33例.DNA测序结果与标准株序列相同16例,余17例存在23S rRNA V区碱基点突变:A2063G突变10例,A2064G突变3例,A2067G突变2例,A2063T突变、G2062A突变各1例.2组患儿在就诊前是否口服大环内酯类药物方面无显著性差异(P=0.909),门诊与既往病房MP耐药率亦无显著差异(P=0.459).结论 MP耐药突变位点仍以A2063G突变为主.存在少数A2064G突变,新发现了A2063T、A2067G、G2062A位点突变,可能与耐药相关.