目的 探讨黄连素联合万古霉素对难辨梭菌（Clostridium difficile, CD）体外分离株的抗菌效果,以期为临床CD感染相关性疾病的治疗提供新思路。方法 选取35株临床分离CD菌株,应用琼脂稀释法进行万古霉素（浓度范围为0.0625～4 mg/L）或黄连素（浓度范围为8～512 mg/L）对CD的单一药敏或联合药敏试验,统计单一用药和联合用药情况。结果 35株CD临床分离菌株均对黄连素和万古霉素敏感,对黄连素和万古霉素的药物敏感性范围分别为128 mg/L～512 mg/L和0.25 mg/L～2 mg/L,50%最低药物抑制浓度（MIC50）值分别为512 mg/L和0.25 mg/L,90%最低药物抑制浓度（MIC90）值分别为)512 mg/L和1 mg/L。不同浓度的黄连素分别与0.0625～4 mg/L的万古霉素联合,协同作用最强的是128 mg/L黄连素和1 mg/L万古霉素联合（占比5.71%）,相加作用最强的是64 mg/L黄连素和0.5 mg/L万古霉素联合（占比25.71%）,无关作用最强的是8 mg/L黄连素分布联合0.0625 mg/L万古霉素（占比97.14%）,未发现黄连素联合万古霉素出现拮抗作用的菌株（χ2＝9.85,P＝0.003）。结论 黄连素可增加万古霉素对CD的抗菌活性,具有临床联合用药价值。