摘要:
调节性T淋巴细胞(CD4+ CD25+Treg,Treg)对同种反应性T淋巴细胞具有强烈的抑制作用,抗原特异性Treg对特定抗原的免疫抑制作用明显加强.本研究旨在研究利用小鼠脾细胞培养抗原特异性Treg细胞.一、材料与方法1.抗原特异性Treg的培养与扩增:利用Milteny分选试剂盒及磁性分选器,无菌状态下取BALB/c小鼠的脾脏Treg.提取C57小鼠脾细胞,经丝裂霉素C灭活后与BALB/c小鼠Treg细胞(10∶1)于96孔培养板中混合培养,培养基选用RPMI 1640完全培养基,配以10%胎牛血清、白细胞介素(IL)-2 2000 U/ml、雷帕霉素100μmol/L,37℃、5% CO2、饱和湿度培养箱中培养14 d,第3、5、7、9、11天换液,第14天收集细胞.