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◇ 统计源期刊
文章类型:
单位:
[1] 首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心
临床科室
国家中心肝病分中心
首都医科大学附属北京友谊医院
[2] 首都医科大学附属北京友谊医院肝硬化转化医学北京市重点实验室
首都医科大学附属北京友谊医院
[3] 首都医科大学附属北京友谊医院普外科
首都医科大学附属北京友谊医院
出处:
ISSN:
关键词:
RNA干扰
转染
T淋巴细胞
摘要:
目的探讨人工合成RNA转染人外周血原代T淋巴细胞的有效方法。方法从人外周血分离原代T淋巴细胞,采用Lipofectamine2000、Lipofectamine RNAiMAX、FuGENE6、Hiperfect和EntransterTM-R 5种不同转染试剂介导荧光标记的RNA转染原代T淋巴细胞,通过荧光显微镜观察及流式细胞术检测进行转染效率评价。结果分离的人外周血原代T淋巴细胞的纯度达到87.4%。采用上述5种转染试剂介导荧光标记的RNA转染T淋巴细胞,24 h后转染效率分别为(14.81±1.03)%、(14.33±1.24)%、(2.10±0.16)%、(1.69±0.08)%、(72.24±1.26)%。采用EntransterTM-R转染100及50 nmol/L对照RNA,24 h后转染效率分别为73.7%和56.0%;EntransterTM-R转染100 nmol/L对照RNA后48、72 h荧光标记细胞阳性率分别为62.0%、56.6%。结论转染试剂EntransterTM-R可有效介导人工合成RNA转染人外周血原代T淋巴细胞。
基金:
国家自然科学基金(81000172、81370544);;北京市自然科学基金(7142043);;王宝恩肝纤维化研究基金(20120131);
第一作者:
第一作者单位:
[1] 首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心
[2] 首都医科大学附属北京友谊医院肝硬化转化医学北京市重点实验室
推荐引用方式(GB/T 7714):
张群,庞国进,刘天会,等.小rna转染人外周血原代t淋巴细胞的转染试剂筛选[J].中国医药生物技术.2014,9(5):321-327.