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糖络宁对高糖环境中雪旺细胞内质网应激ire1通路的影响

Effects of Tangluoning on IRE1 pathway of endoplasmic reticulum stress in schwann cells in high glucose environment

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收录情况: ◇ 统计源期刊

单位: [1]首都医科大学附属北京友谊医院中医科 [2]首都医科大学附属北京妇产医院药学部 [3]首都医科大学中医药学院 [4]北京中医药大学东方医院
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关键词: 糖尿病周围神经病变 内质网应激 糖络宁 肌醇依赖酶1 X盒结合蛋白 肿瘤坏死因子受体相关因子2 c-Jun氨基末端激酶

摘要:
目的观察中药复方糖络宁对高糖环境下雪旺细胞的抗凋亡保护作用,探讨糖络宁对于内质网应激IRE1信号通路的调控作用。方法在高糖环境中培养雪旺细胞,设置空白对照组、模型组、糖络宁组、不同阻断剂组。培养12、24小时后,应用流式细胞术检测糖络宁含药血清处理下的细胞凋亡水平,应用免疫印迹法(Western blot,WB)检测内质网应激的IRE1-TRAF2-JNK凋亡通路的标志蛋白肌醇依赖酶1(inositol-requiting enzyme 1,IRE1)、X盒结合蛋白(X-box binding protein 1,XBP1)、肿瘤坏死因子受体相关因子2(TNF receptor-associated factor 2,TRAF2)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)的表达,应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测XBP1、TRAF2、JNK的基因表达。结果高糖孵育雪旺细胞12、24小时可显著诱导其损伤,细胞活力下降;与正常组比较,高糖环境下雪旺细胞凋亡水平明显升高(P(0.05);与模型组比较,糖络宁含药血清能够改善高糖环境下雪旺细胞的凋亡(P(0.05)。在造模后检测时间点12小时、24小时,与空白组比较,模型组IRE1α、TRAF2和JNK表达显著升高(P(0.05);与模型组比较,糖络宁组含药血清组TRAF2和JNK蛋白的表达显著降低(P(0.05)。在造模后检测时间点12小时,与空白组、模型组比较,糖络宁组含药血清组XBP1蛋白表达显著升高(P(0.05)。PCR结果显示,糖络宁含药血清能够发挥类似于TRAF2 siRNA阻断剂的作用,抑制IRE1途径下游凋亡通路。结论糖络宁可对抗高糖环境引起的雪旺细胞损伤,作用机制与调控内质网应激IRE1信号通路有关。在IRE1通路被激发的初期,可能激活IRE1-XBP1通路,提高高糖环境下雪旺细胞的存活能力;当内质网应激过载时糖络宁抑制IRE1-TRAF2-JNK通路,减轻高糖环境下的雪旺细胞的凋亡。

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第一作者单位: [1]首都医科大学附属北京友谊医院中医科
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