目的 了解儿童急性呼吸道感染病原分布情况，并评估多重聚合酶链反应（PCR）技术的临床应用价值。方法 收集2018年1月–2019年1月北京地区多个医院268例呼吸道感染患儿的咽拭子及支气管肺泡灌洗液，采用多重PCR技术测定13种病原的核酸，同时应用荧光定量PCR法检测肺炎支原体核酸，分析儿童急性呼吸道感染病原分布情况，并比较两种检测方法的一致性。结果 268例呼吸道标本，231例（86.19%）检出至少一种以上的病原，51例（19.03%）检出两种或两种以上病原。肺炎支原体（MP）和流感病毒占所检病原的前两位，检出的病原体按例数分别为MP109例、H1N143例、InfA36例、RSV 29例、H3N2 14例、HRV 14例、HMPV 13例、InfB 10例、HAd V 9例、HCoV 6例、HPIV 5例、HBoV1例、CP1例。多重PCR方法检测出MP阳性109例（40.67%），实时定量PCR法检测出MP阳性123例（45.90%），两种检测方法阳性率比较差异无统计学意义（P=0.262），一致性分析显示两种检测方法具有高度的一致性（Kappa=0.879）。结论 MP及流感病毒是北京地区儿童呼吸道感染的重要病原，而且混合感染的情况并不少见。对于MP，多重PCR技术和实时荧光定量PCR法敏感性基本一致，两者具有高度的一致性，多重PCR技术可同时检测病毒、MP、CP等多种病原体，特异性强，可提高样本使用率，具有良好的应用价值。