目的探讨多重聚合酶链反应（PCR）检测方法在儿童流感样病例病原检测中的临床应用价值,了解儿童流感样病例病原情况。方法收集2018年11月至2019年2月北京地区94例儿童流感样病例咽拭子标本,采用多重PCR核酸检测技术测定甲型流感病毒（InfA）、甲型流感病毒H1N1（InfA-H1N1）、甲型流感病毒H3N2（InfA-H3N2）、乙型流感病毒（InfB）、人副流感病毒、呼吸道合胞病毒（RSV）、人腺病毒（HADV）、人鼻病毒（HRV）、人博卡病毒、人偏肺病毒（HMPV）、人冠状病毒（HCoV）和肺炎支原体（MP）、衣原体13种病原核酸。结果 94例标本中78例（82.98%）可测出病原,其中69例（73.40%）检出1种病原,9例（9.57%）检出2种病原;94例标本中52例（55.32%）检出流感病原,26例（27.66%）检出非流感病原。单一病原检出由多到少为InfAH1N1 31例,InfA-H3N2 10例,RSV 9例,HMPV 7例,InfA、HRV、HADV各3例,InfB、HCoV及MP各1例。9例检出2种病原的标本中,6例检出流感分别合并其他病毒（HRV、HADV、RSV、HCoV、HMPV）,1例检出甲流H1N1和H3N2,2例分别检出RSV、HRV及HCoV、HADV。结论非流感病原微生物引起流感样病例并不少见,多重PCR检测有助于全面了解流感样病例的病原和混合感染情况。