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非肺孢子菌肺炎患者支气管肺泡灌洗液肺孢子菌检出情况

Detection results of Pneumocystis jirovecii from non-Pneumocystis pneumonia patients' bronchial alveolar lavage fluid samples

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收录情况: ◇ 统计源期刊

单位: [1] 首都医科大学附属北京友谊医院北京热带医学研究所热带病防治研究北京市重点实验室 [2] 首都医科大学基础医学院病原生物学系 [3] 首都医科大学附属北京天坛医院麻醉科
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关键词: 耶氏肺孢子菌 非肺孢子菌肺炎 核酸扩增试验 支气管肺泡灌洗液

摘要:
目的利用常规PCR、巢式PCR(Nest PCR,n PCR)和定量PCR(Quantitative PCR,qPCR)方法,调查非肺孢子菌肺炎(Non-Pneumocystis pneumonia,non-PCP)患者支气管肺泡灌洗液(Bronchial alveolar lavage fluid,BALF)中耶氏肺孢子菌(Pneumocystis jirovecii,Pj)的检出情况。方法入选non-PCP患者50例留取BALF,分别以线粒体大亚基r RNA(Mi-tochondrial large subunit r RNA,mt LSUr RNA)为靶基因进行常规PCR(Mt-PCR)和巢氏PCR(Mt-nPCR),以主要表面糖蛋白(Major surface glycoprotein,Msg)为靶基因进行常规PCR(Msg-PCR),检测Mt-PCR,Mt-nPCR和Msg-PCR三种方法的Pj特异性核酸片段检出率,并对PCR检出为阳性的样本分别用以mt LSU r RNA和Msg为靶基因的qPCR来检测相应Pj核酸片段拷贝数。结果 50例BALF中,Mt-n PCR、Mt-PCR及Msg-PCR的检出率分别为56%(28/50)、36%(18/50)和26%(13/50),其中三种检测方法同时阳性5例(10%),任意两种方法阳性13例(26%),任意一种方法阳性18例(36%),三种方法均为阴性14例(28%)。36例PCR检测结果阳性的标本分别进行mtLSUrRNA定量PCR(Mt-qPCR)和Msg定量PCR(Msg-qPCR)检测,其中Mt-qPCR检测结果为:1 000拷贝/μL9 999拷贝/μL有36例(100%);Msg-qPCR检测结果为:100拷贝/μL999拷贝/μL有3例(8.3%),1 000拷贝/μL9 999拷贝/μL有16例(44.4%),10 000拷贝/μL99 999拷贝/μL有9例(25%),105拷贝/μL以上8例(22.2%)。36例配对检测qPCR样本中,Msg-qPCR拷贝数大于Mt-qPCR拷贝数样本28例(77.8%)。结论在non-PCP患者BALF中,Pj核酸扩增方法的检出率为72%,Mt-qPCR拷贝数主要位于103拷贝/μL数量级,Msg-qPCR拷贝数主要分布于103至105拷贝/μL。用核酸扩增方法在BALF中检测出Pj时,临床意义解读需要谨慎。

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第一作者:
第一作者单位: [1] 首都医科大学附属北京友谊医院北京热带医学研究所热带病防治研究北京市重点实验室
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