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◇ 统计源期刊
文章类型：
单位：
[1]首都医科大学附属北京友谊医院骨科中心 北京 100050
临床科室
骨科
骨科
首都医科大学附属北京友谊医院
出处：
ISSN：
关键词：
诱导性多能干细胞
CRISPR/Cas9
硬骨素基因
摘要：
目的利用CRISPR/Cas9技术构建硬骨素（SOST）基因荧光报告诱导性多能干细胞（i PSCs）细胞株。方法使用PCR检测i PSCs分化过程不同阶段成骨基因的表达。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术将p2A-td TomatoNeo质粒转染至i PSCs细胞。使用PCR凝胶电泳检测转染的效果,而后分别在光镜下观察成骨不同阶段i PSCs的形态变化、茜素红染色及SOST-td Tomato荧光表达情况,并利用茜素红染色及PCR评估转染细胞的成骨效果及成骨基因表达情况。结果 PCR检测结果发现,SOST只在骨细胞中稳定表达,可作为骨细胞的标志性基因。利用CRISPR/Cas9技术将td Tomato插入到SOST终止密码子处,转染后的i PSCs细胞株不影响其成骨效果及SOST基因的表达。结论利用CRISPR/Cas9技术能够成功构建td Tomato-SOST荧光报告基因的i PSCs细胞株。
基金：
北京市科技计划课题"首都市民健康培育"（编号:Z171100000417053）；
第一作者：
第一作者单位：
[1]首都医科大学附属北京友谊医院骨科中心 北京 100050
通讯作者：
推荐引用方式(GB/T 7714)：
于凌佳,孟海,杨雍,等.利用crispr/cas9技术建立sost荧光报告基因ipscs细胞系[J].临床和实验医学杂志.2020,19(6):561-565.
