资源类型：
收录情况：
◇ 统计源期刊
文章类型：
单位：
[1] 首都医科大学附属北京友谊医院,北京热带医学研究所
医技科室
北京热带医学研究所
北京热带医学研究所
首都医科大学附属北京友谊医院
[2] 热带病防治研究北京市重点实验室
[3] 中国食品药品检定研究院,生物制品检定所,寄生虫疫苗室
出处：
ISSN：
关键词：
刚地弓形虫
棒状体蛋白ROP5
原核重组表达
抗原性
摘要：
目的在大肠杆菌工程菌中重组表达刚地弓形虫RH株棒状体蛋白5（ROP5）的融合蛋白GST-6×His-ROP5,并初步评价重组蛋白的抗原性。方法体外细胞培养弓形虫速殖子,提取总RNA,反转录获得cDNA,PCR扩增ROP5基因全长,与pET-41 Ek/LIC载体通过基因重组直接连接,在大肠杆菌RosettaTM（DE3）pLysS工程菌中诱导表达重组融合蛋白,最后通过Western blotting鉴定重组蛋白rROP5的抗原性。结果构建了弓形虫ROP5全基因重组表达质粒,诱导表达了GST-6×His-ROP5融合蛋白,分子量为96 kDa,与预测结果相符,重组蛋白与人源抗血清有显著免疫印迹反应。结论本研究获得了弓形虫ROP5全长重组蛋白,为进一步改进弓形虫诊断抗原,研究蛋白结构以及分泌蛋白与宿主细胞的相互作用奠定了基础。
基金：
国家自然科学基金项目（No.81071375,No.81301404）；;北京市自然科学基金项目（No.7132042,No.7144196）；;北京市优秀人才培养资助D类项目（No.2013D003034000021）；;首都医科大学基础-临床科研合作基金项目（No.13JL16）；;首都医科大学附属北京友谊医院科研启动基金项目（No.201130yykyqd）；
第一作者：
第一作者单位：
[1] 首都医科大学附属北京友谊医院,北京热带医学研究所
[2] 热带病防治研究北京市重点实验室
推荐引用方式(GB/T 7714)：
薛峰,黄敏君,洪彩玲,等.弓形虫分泌蛋白rop5的全基因原核重组表达与抗原性鉴定[J].中国热带医学.2014,14(3):259-263.
