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收录情况:
◇ 统计源期刊
文章类型:
单位:
[1] 首都医科大学附属北京友谊医院,北京热带医学研究所
医技科室
北京热带医学研究所
北京热带医学研究所
首都医科大学附属北京友谊医院
[2] 首都医科大学附属北京友谊医院,热带病防治研究北京市重点实验室
首都医科大学附属北京友谊医院
出处:
ISSN:
关键词:
刚地弓形虫
致密颗粒蛋白GRA7
反转录基因克隆
原核重组表达
摘要:
目的克隆弓形虫RH株致密颗粒蛋白7(GRA7)的全长基因,在大肠杆菌工程菌中重组表达GST-His-GRA7融合蛋白。方法提取弓形虫总RNA,反转录获得cDNA,PCR扩增GRA7基因全长,与pET-41 Ek/LIC载体通过基因重组直接连接,在大肠杆菌RosettaTM(DE3)pLysS工程菌中诱导表达重组融合蛋白,最后采用SDS-PAGE和West ern blotting鉴定重组蛋白产物。结果构建了弓形虫GRA7全基因的重组表达质粒,诱导表达了GST-His-GRA7融合重组蛋白,分子量为62kD,与预测结果相符。结论研究获得了弓形虫GRA7全基因的重组蛋白,为进一步研究弓形虫GRA7抗原性及其与宿主细胞的相互作用奠定了基础。
基金:
国家自然科学基金面上项目(No.81071375);;北京市自然科学基金面上项目(No.7132042);;首都医科大学基础-临床科研合作基金项目(No.13JL16);;首都医科大学附属北京友谊医院科研启动基金项目(No.201130yykyqd);
第一作者:
第一作者单位:
[1] 首都医科大学附属北京友谊医院,北京热带医学研究所
推荐引用方式(GB/T 7714):
洪彩玲,薛峰,黄敏君,等.弓形虫致密颗粒蛋白gra7的全基因原核重组表达[J].中国热带医学.2013,13(9):1045-1047+1050.